PCR熒光分析濾光片解決方案
PCR熒光分析,即實(shí)時(shí)熒光定量PCR(Real-Time Quantitative PCR,簡(jiǎn)稱(chēng)qPCR),是一種在PCR擴(kuò)增反應(yīng)中,通過(guò)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)熒光信號(hào)的變化來(lái)對(duì)特定DNA或RNA序列進(jìn)行定性和定量分析的技術(shù)。這種技術(shù)結(jié)合了PCR的高效率和熒光探針的高靈敏度,使得在PCR反應(yīng)過(guò)程中能夠?qū)崟r(shí)地監(jiān)測(cè)到DNA或RNA的擴(kuò)增情況,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)目標(biāo)分子的精確定量。
(圖源網(wǎng)絡(luò),侵刪)
激埃特光電的團(tuán)隊(duì)設(shè)計(jì)并制造了行業(yè)中最多種應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)熒光探測(cè)及高分辨率要求分析系統(tǒng)的熒光濾光片,如PCR分析儀、POCT、熒光顯微鏡、流式細(xì)胞儀等;通過(guò)對(duì)最受歡迎熒光基團(tuán)的優(yōu)化,采用精湛的鍍膜工藝,熒光濾光片在多通道熒光測(cè)試中的串?dāng)_系數(shù)已達(dá)到非常低的理想水平。
PCR熒光分析濾光片解決方案主要涉及到PCR熒光分析儀器中使用的濾光片的設(shè)計(jì)和制造。
濾光片設(shè)計(jì):PCR濾光片通常由激發(fā)濾光片、二向色鏡和發(fā)射濾光片組成。激發(fā)濾光片可以透過(guò)特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的激發(fā)光,并阻擋其他波長(zhǎng)范圍內(nèi)的雜散光,從而提高激發(fā)效率和信噪比。二向色鏡可以將激發(fā)濾光片透過(guò)的激發(fā)光反射到樣品上,并將樣品發(fā)出的熒光信號(hào)透過(guò)到檢測(cè)器上,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)激發(fā)和發(fā)射兩個(gè)方向上不同波長(zhǎng)范圍內(nèi)的光線進(jìn)行分離。發(fā)射濾光片可以透過(guò)特定波長(zhǎng)范圍內(nèi)的熒光信號(hào),并阻擋其他波長(zhǎng)范圍內(nèi)的雜散光,從而提高檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確度。
解決方案:
典型試劑 | 激發(fā)濾光片 | 二向色鏡 | 發(fā)射濾光片 | 截止深度 | 截止范圍 |
Atto425 | BP430/24x | LP460dc | BP480/30m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
FAM | BP470/30x | LP505dc | BP520/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
BP470/30x | LP505dc | BP525/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
HEX/VIC | BP525/20m | LP550dc | BP565/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
BP530/20x | LP550dc | BP565/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
Cy3 | BP543/20x | LP565dc | BP585/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
BP545/25x | LP565dc | BP585/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
ROX | BP570/20x | LP590dc | BP612/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
BP570/20x | LP590dc | BP615/40m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
BP580/20x | LP599dc | BP615/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
Cy5 Quasar? 670 | BP620/16x | LP635dc | BP665/16m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
BP630/20x | LP647dc | BP665/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
BP635/20x | LP662dc | BP682/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
BP640/16x | LP662dc | BP680/16m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm | |
Atto633 | BP620/20x | LP635dc | BP655/20m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
Cy5.5 Quasar? 705 | BP675/20x | LP702dc | BP725/40m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
BP682/20x | LP702dc | BP725/40m | OD2-OD6 | 200nm-1100nm |
PCR光譜圖參考:
通道1: FAM/SYBR Green | 通道2: HEX/VIC/JOE/TAMRA |
通道3: Cy3 | 通道4: ROX/TexRed |
通道5: CY5/Quasar-670 | 通道6: CY5.5 |